Los ecosistemas de agua dulce son clave para la biodiversidad y albergan cerca de 18 000 especies de peces, pero enfrentan amenazas como contaminación, cambio climático, fragmentación de hábitats y especies invasoras. Los estudios sobre peces de ríos en Panamá iniciaron a principios del siglo XX y han avanzado progresivamente con el tiempo. Sin embargo, En la provincia de Chiriquí (Panamá) existen pocos estudios sobre peces de agua dulce; este trabajo actualiza el listado realizado por Batista y Garúz (1999) y aporta nueva información sobre su distribución. El estudio se realizó en época seca (diciembre 2023 – mayo 2024) en 18 ríos pertenecientes a seis cuencas hidrográficas de la provincia. Se usaron diferentes artes de pesca y se midieron parámetros ambientales como pH, temperatura, oxígeno disuelto, conductividad y velocidad de corriente, además de caracterizar el hábitat y tomar las coordenadas geográficas. Se registraron 39 especies, agrupadas en 20 familias y 10 órdenes, con un total de 514 individuos colectados. El orden más diverso fue Characiformes; la familia con mayor riqueza fue Cichlidae y el género más abundante fue Astyanax sp. En comparación con el estudio de 1999 (42 especies), se observaron tres especies menos. Esta diferencia, aunque mínima, puede deberse a la combinación de factores, incluidos, los cambios en el uso del suelo, la actividad humana y las actualizaciones taxonómicas recientes. La calidad del hábitat fue óptima en los ríos Caldera, Estí y Santiago; marginal en el río Chico (asociado a una hidroeléctrica); y subóptima en los demás ríos. Esto puede estar relacionado con la presencia de una hidroeléctrica cercana, ya que altera el régimen de los caudales y reduce la diversidad de hábitats acuáticos. Los demás ríos se clasificaron como subóptimos. El análisis de los parámetros fisicoquímicos mostró diferencias significativas entre los ríos, evidenciando la influencia de las actividades humanas. El pH fue alcalino en el río Chorcha (8.56), posiblemente por la cercanía de cultivos de arroz, mientras que el río Platanal presentó un pH cercano a la neutralidad (7.31), asociado a desechos orgánicos de una porqueriza. En cuanto a la temperatura, el valor más alto se registró en el río Chiriquí Nuevo (33 °C) y el más bajo en el Chiriquí Viejo (22 °C), variaciones atribuibles a la hora de muestreo y a factores climáticos locales. El oxígeno disuelto también varió, con sobresaturación en el río Caldera (103.7 %) y el valor más bajo en el Platanal (84.1 %), relacionado con su baja velocidad de corriente. Se realizó un análisis multivariado de índice de similitud entre estudios; donde se comparó primeramente la similitud entre estudios de modo general, mostrando un 87 % de similitud; a nivel de cuencas la del río Fonseca (112) mostró entre si un 82 % de similitud; y a nivel de ríos el río Platanal reveló un 90 % de similitud entre ambos. Algunos ríos presentaron muestreo altamente representativo, mientras que otros mostraron baja cobertura, sugiriendo la posibilidad de especies aún no registradas. Los resultados reflejan cambios significativos en la composición y distribución de la ictiofauna en comparación con el estudio previo. Lo que podría estar relacionado con procesos naturales de cambios ambientales y la influencia de actividades humanas como la agricultura, ganadería y la canalización de los ríos por los procesos de creación de hidroeléctricas.